ClonPlus 采用了一种简单、快速并且高效的 DNA 片段定向克隆技术，可将目的片段定向克隆至任意载体的任意位点。

将载体进行线性化，在目的片段的两条 PCR 扩增引物的 5’端分别引入线性化载体的末端序列，使得目的片段经 PCR扩增后，其 5’端和 3’端分别带有与线性化载体的两个末端 15~20 nt 的序列同源的序列。将两端带有同源序列的 PCR产物与线性化的载体按一定比例混合后，在重组酶的催化下，只需 5~45 min 就可以实现 DNA 片段的定向克隆。 ClonPlus One Step Cloning Mix 无缝克隆试剂盒，一次反应可高效完成单个至多个 DNA 片段的同源重组，兼容性广且阳性率高。

产品组成

储存条件
本产品需置于-20℃中储存，使用时尽可能避免反复冻融。

1.平板上仅有少数克隆。
使用转化效率大于 108 cfu/μg 的感受态细胞进行转化。
将线性化载体和目的片段的 PCR 产物进行凝胶回收纯化，纯化产物溶解在 ddH2O 中。

2.较多克隆不含目的片段。
增加限制性内切酶的使用量或延长酶切反应时间或胶回收纯化酶切产物。

3.较多克隆含有不正确的目的片段。优化 PCR 反应体系，提高特异性。
胶回收纯化 PCR 产物。

4.较多克隆的菌落 PCR 无条带。优化 PCR 反应体系和反应程序。