Lipo2000转染试剂

高效转染

无需减血清培养基

目录价
4000
货号:
100-507
规格:
1.5ml
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货号: 100-507

 

产品保存:

4℃储存,有效期12个月。切勿冷冻!

 

产品简介:

本产品是基于脂质体纳米颗粒(LNP)递送技术的阳离子脂质体转染试剂,适合将核酸转染入培养的细胞中。本转染试剂对于常见的哺乳动物细胞系具有非常高的转染效率、重复性好、操作简单、无明显的细胞毒性,且对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用,可在含血清与抗生素的完全培养基中发挥作用。本试剂在转染大至13kb的质粒时,依然保持了高效率。

 

产品组成

 

货号

组分

规格

100-507

Lipo2000转染试剂

1.5 mL

 

 

产品特征

1.转染效率高,操作简便,毒性低,重复性好。对于大部分细胞系,如:HEK293T 、HEK293F、CHO和HeLa等,按照DNA用量(μg)和转染试剂(μL)的比例为1:2至1:3使用时,转染效率可达80%- 90%。
2.兼容性好,转染可在有血清和抗生素存在的情况下进行,无需预先更换Opti-MEM®或其它无血清培养基。
3.转染试剂为化学合成产物,不含动物源成分(Animal origin-free, AOF)。
4.本品已经0.22µm滤膜过滤除菌。

 

产品效果

 

 


使用说明

(本说明书以6孔板,293T细胞为例)

1. 接种细胞

转染前一天,将293T细胞接种在6孔板中,3×10^5~5×10^5每孔,使用含10%血清的DMEM培养18-22小时。

2. 转染过程

a) 配置DNA稀释液(每孔):将2 µg质粒DNA加入100 μL无血清DMEM培养基中,充分混匀。

b) 配置Lipo2000稀释液(每孔):另取一个1.5 mL离心管,加入100 μL无血清DMEM培养基和4 µL Lipo2000(吸取前先混匀) ,轻柔混匀,室温静置5分钟。

c)将DNA稀释液加到Lipo2000稀释液中,合并后轻柔混匀,室温静置20分钟,形成DNA- Lipo2000复合物。

d) 用移液枪将DNA-Lipo2000复合物分散滴入细胞培养孔中,轻轻摇晃6孔板以混匀。

e) 转染6小时后,除去旧的培养基,更换为2 mL新鲜的含10%血清的DMEM培养基。

f)继续培养24到48小时,进行后续实验。

 

不同规格细胞培养容器,DNA与转染试剂用量参考表

 

 

细胞培养容器

细胞培养基体积

(每孔)

稀释用无血清培养基体积

 

DNA 用量

 

转染试剂

96-well 板

100 µL

10 µL

0.1 µg

0.25 µL

48-well 板

200 µL

20 µL

0.2 µg

0.5 µL

24-well 板

500 µL

50 µL

0.5 µg

1.25 µL

12-well 板

1 ml

50 µL

1 µg

2.5 µL

6-well 板

2 ml

100 µL

2 µg

5 µL

6 cm 培养皿

4 ml

200 µL

4 µg

10 µL

10 cm 培养皿

10 ml

500 µL

10 µg

25 µL

 

 

注意事项

  1. 转染前细胞须处于良好的生长状态。选用处于对数生长期、活力高、传代次数低的细胞可获得较佳的转染效果
  2. 质粒DNA的质量是转染成功的关键。建议使用高纯度,无内毒素质粒。质粒用量需根据细胞类型和具体试验条件而调整。
  3. 根据具体的试验条件和细胞类型,DNA(µg)/转染试剂(µL)的比例建议在1:1至1:4之间优化。过量会加剧细胞毒性。转染时间不宜超过6小时。
  4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  6. 使用中遇到任何问题,请联系我们的技术支持。