分子生物学
非脂质体毒性低,常用工具细胞转染效率达90%
RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR (probe)kit
无需额外提取RNA
10个细胞可直接测qPCR
RNAflash DCA(Direct Cellular Amplification)one step RT qPCR (SYBR Green)kit-MAX
无需额外提取RNA和逆转录
10个细胞可直接测qPCR
RNAflash DCA(Direct Cellular Amplification)one step RT qPCR (SYBR Green)kit
无需额外提取RNA和逆转录
10个细胞可直接测qPCR
5~45min定向无缝克隆,兼容性广阳性率高
4℃储存,有效期12个月。长期不使用可置于-20ºC保存。常温运输。
本产品是新一代水溶性高分子,高电荷阳离子聚合物转染试剂,可与带负电荷的质粒DNA形成稳定的复合物,然后黏附到带有负电荷的细胞表面,透过细胞膜进入细胞内。本产品适用于把质粒DNA高效瞬时转染到贴壁或悬浮细胞中,可在含血清与抗生素的完全培养基中充分发挥作用。本试剂在转染大至13kb的质粒时,依然保持了高效率。
货号 |
组分 |
规格 |
100-505 |
ezFect DNA transfection reagent |
1 mL |
细胞类型:293F
转染质粒:13kb质粒
转染条件:6孔板 转染10h,转染后36h观察
(本说明书以6孔板,293T细胞为例)
1. 接种细胞
转染前一天,将293T细胞接种在6孔板中,3×10^5~5×10^5每孔,使用含10%血清的DMEM培养18-22小时。
2. 转染过程
a) 配置DNA稀释液(每孔):将2 µg质粒DNA加入100 μL无血清DMEM培养基中,涡旋混匀5秒或者用移液枪吹打20次。
b) 制备转染复合物(每孔): 向DNA稀释液中直接加入3 μL转染试剂,涡旋混匀5秒或者用移液枪吹打20次,室温静置 20分钟(不宜超过30分钟)。
c) 用移液枪将转染复合物分散滴入细胞培养孔中,轻轻摇晃6孔板以混匀。
d) 转染10-16小时,除去旧的培养基,更换为2 mL新鲜的含10%血清的DMEM培养基。e) 继续培养24到48小时,进行后续实验。
细胞培养容器 |
培养基体积 |
稀释液体积 |
DNA 用量 |
转染试剂 |
96-well 板 |
100 µL |
10 µL |
0.1 µg |
0.15 µL |
48-well 板 |
200 µL |
20 µL |
0.2 µg |
0.3 µL |
24-well 板 |
500 µL |
50 µL |
0.5 µg |
0.75 µL |
12-well 板 |
1 ml |
50 µL |
1 µg |
1.5 µL |
6-well 板 |
2 ml |
100 µL |
2 µg |
3 µL |
6 cm 培养皿 |
4 ml |
200 µL |
4 µg |
6 µL |
10 cm 培养皿 |
10 ml |
500 µL |
10 µg |
15 µL |
注意事项